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什么是解凍血清的優(yōu)良方法？
血清在 2-8°C 下解凍以防止降解；或者，它可以在室溫下解凍并定期攪拌以重新懸浮內(nèi)容物。
解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基之前應(yīng)充分混合。
高于 37°C 的溫度會(huì)加速關(guān)鍵血清因子的降解，從而影響血清性能，在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)避免。
血清中的沉淀物是什么？
解凍或長(zhǎng)時(shí)間冷凍和/或冷藏后可能會(huì)出現(xiàn)混濁和絮狀物質(zhì)。我們的經(jīng)驗(yàn)表明，這些修飾不會(huì)影響血清的生物學(xué)性能。
一些沉淀是由纖維蛋白引起的：
我們的采集程序和快速冷凍可能會(huì)在血清中留下一些纖維蛋白原。纖維蛋白原是凝塊形成蛋白纖維蛋白的可溶性前體。纖維蛋白可能在解凍或熱滅活后出現(xiàn)。纖維蛋白不會(huì)改變血清促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。建議使用未經(jīng)處理（過(guò)濾或離心）的血清。
一些沉淀是由磷酸鈣引起的：
在 37°C 下長(zhǎng)時(shí)間孵育的血清會(huì)變得混濁并可能出現(xiàn)沉積物。它們由鈣和磷組成。據(jù)我們所知，這不會(huì)改變細(xì)胞培養(yǎng)物中血清的性能。
血清需要加熱滅活嗎？
對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，不推薦熱滅活血清。熱滅活會(huì)降解補(bǔ)體蛋白，這可能會(huì)干擾免疫分析。長(zhǎng)時(shí)間加熱血清會(huì)減少或破壞生長(zhǎng)因子，并增加沉積物的形成，這些沉積物通常被誤認(rèn)為是微生物污染。
血清應(yīng)該如何熱滅活？
首先在 2-8°C 下解凍血清和對(duì)照血清瓶。
攪拌瓶裝血清，避免解凍過(guò)程中形成沉淀物，然后將其放入調(diào)至80°C的水浴中。
一旦控制瓶溫度達(dá)到50°C，將恒溫槽調(diào)至70°C；當(dāng)瓶子溫度達(dá)到 55°C 時(shí)，將恒溫器更改為 60°C。
當(dāng)血清達(dá)到 56°C 的溫度時(shí)，使用計(jì)時(shí)器（30 分鐘是注冊(cè)時(shí)間）并將水浴的恒溫器更改為 56°C。在這 30 分鐘內(nèi)，定期檢查溫度并通過(guò)調(diào)節(jié)恒溫器、添加一些冷水以及是否降低蓋子來(lái)保持溫度穩(wěn)定。每 5 到 10 分鐘攪拌一次血清。
將血清在室溫下保持 30 分鐘，然后將血清冷凍在 -20°C。
注：
。攪拌對(duì)于良好的血清質(zhì)量至關(guān)重要。如果血清沒(méi)有正確混合，會(huì)出現(xiàn)鹽、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的沉淀物，并形成結(jié)晶和絮凝沉積物。這些沉積物對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)毒，但會(huì)影響血清外觀和稠度。
. 長(zhǎng)時(shí)間加熱血清會(huì)破壞生長(zhǎng)促進(jìn)劑，這也會(huì)導(dǎo)致沉積物形成。
血清在 +2 至 +8°C 之間可以儲(chǔ)存多長(zhǎng)時(shí)間？
血清可在 +2 至 +8°C 之間儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá) 8 周而不會(huì)降低其性能 (*)。
Biowest 的內(nèi)部研究表明，在 26 周的儲(chǔ)存期間（+2 至 +8°C），血清促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的能力沒(méi)有顯著改變。
(*) Art to Science，第 19 卷，第 2 期，“冷藏溫度 (2-8°C) 下的血清穩(wěn)定性"。
血清的推薦儲(chǔ)存溫度是多少？
血清應(yīng)冷凍保存并避光。推薦的存儲(chǔ)溫度為 -10°C 至 -40°C。在低于 -40°C 的溫度下，瓶子可能會(huì)變脆，增加破裂的風(fēng)險(xiǎn)。
胰蛋白酶產(chǎn)品的顏色并不總是相同是否正常？
一些胰蛋白酶制劑含有酚紅。由于產(chǎn)品與干冰一起運(yùn)輸，因此 包裝中可能會(huì)積聚大量 CO 2。這種 CO 2 可能會(huì)進(jìn)入溶液并稍微降低 pH 值，呈現(xiàn)橙色（pH 值 6.5 左右）與粉紅色（pH 值 7.3 左右）的顏色。該溶液，如果橙色（酸性）仍然可以按原樣使用，或者可以添加氫氧化鈉來(lái)調(diào)節(jié) pH 值。
四環(huán)素對(duì) FBS 在細(xì)胞生物學(xué)中的意義
四環(huán)素是一類廣譜抗生素，通過(guò)阻斷氨酰基-tRNA 與核糖體的結(jié)合來(lái)抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成。由于對(duì)抗生素抗性微生物發(fā)展的日益關(guān)注，歐盟在 1970 年代初期禁止使用四環(huán)素作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑。然而，在世界其他地方，四環(huán)素仍然是家畜常用的抗生素之一。自 1992 年以來(lái)，四環(huán)素控制的轉(zhuǎn)錄激活系統(tǒng)，或通常稱為“Tet-Off"和“Tet-On"系統(tǒng)，已被用于在全球?qū)嶒?yàn)室使用的細(xì)胞系模型中誘導(dǎo)哺乳動(dòng)物表達(dá)。在 Tet-Off 系統(tǒng)中，如果存在四環(huán)素，則基因表達(dá)會(huì)被沉默，并且通過(guò)從培養(yǎng)基中去除四環(huán)素來(lái)誘導(dǎo)表達(dá)。反之亦然，
兩種系統(tǒng)對(duì) FBS 中發(fā)現(xiàn)的甚至少量四環(huán)素都非常敏感。因此，如果研究人員使用這些工具來(lái)控制他的細(xì)胞培養(yǎng)模型中的基因表達(dá)，那么供應(yīng)*不含四環(huán)素的 FBS 就非常重要。
請(qǐng)隨時(shí)聯(lián)系您的 biowest 代表，以獲取更多信息或指導(dǎo)，以便為您的四環(huán)素敏感應(yīng)用選擇最合適的批次。
為什么只選擇AB血型？
來(lái)自 AB 型供體的人血清缺乏針對(duì) A 和 B 血型抗原的抗體。因此，它最大限度地減少了免疫反應(yīng)性，因?yàn)榇蠖鄶?shù)人類血清使用者都在處理來(lái)自免疫系統(tǒng)的細(xì)胞。
為什么人類血清只存在于男性供體中？
懷孕的婦女可能會(huì)產(chǎn)生針對(duì)父親細(xì)胞和/或胎兒細(xì)胞上攜帶的主要組織相容性類 (MHC) 抗原的抗體。男性捐贈(zèng)者不存在此類風(fēng)險(xiǎn)。
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