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Abwayss常見問題
發(fā)布時間： 2021-06-22 點(diǎn)擊次數(shù)： 1241次北京華新康信為Abways特約代理Abways北京代理 Abways天津代理Abways上海代理 Abways 廣州代理 Abways 華北代理 Abways 華中代理Abways 華南代理Abways 武漢代理Abways 產(chǎn)品 Abways 現(xiàn)貨 Abways 知識介紹 Abways 系列 Abways 廣東代理，Abways 云南代理 Abways 廣西代理Abways 山西代理Abways 山東代理 Abways *Abways 代理活動Abways 代理系列產(chǎn)品，歡迎選購*活動，*，期待您的溝通，愿意為您提供滿意的服務(wù)。
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β肌動蛋白抗體
貨號： AB0035規(guī)格 : 50μl, 100μl
摩爾重量： 42kDaUniProt : P60709
同種型：兔 IgG克隆性：單克隆
可用性 :次日發(fā)貨
產(chǎn)品數(shù)據(jù)表
β肌動蛋白抗體
貨號：AB0035 反應(yīng)性：人鼠鼠
同種型：兔 IgG 應(yīng)用：WB IHC ICC/IF
UniProt ID：P60709
所有名稱：ACTIN；行動管制局； β-肌動蛋白； β 肌動蛋白；肌動蛋白β;
形式：液體
儲存說明：在 +4°C 下短期儲存。長期儲存在-20°C。避免冷凍/解凍循環(huán)。
儲存緩沖液：pH 7.4、150mM NaCl、和 50% 甘油。
純度：親和色譜
免疫原：合成肽
分子量：42 kDa
白平衡 1:3000~1:10000
IHC 1:50~1:200
ICC/IF 1:50~1:200
β-肌動蛋白是已鑒定的六種不同的肌動蛋白亞型之一。在細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的肌動蛋白分子
各種物種和組織的免疫學(xué)和物理特性往往非常相似。所以，
針對 β-肌動蛋白的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的加載對照。不過需要注意的是
β-肌動蛋白的水平在某些細(xì)胞中可能不穩(wěn)定。例如，β-肌動蛋白在脂肪中的表達(dá)
組織非常低，因此不應(yīng)用作這些組織的加載控制。
Abwayss常見問題
問：我應(yīng)該如何儲存我的抗體管？溫度對穩(wěn)定性的影響有多大？
A：請將抗體保存在-20°C 的原始試管中，不要等分。避免反復(fù)凍結(jié)！
問：我應(yīng)該如何儲存細(xì)胞裂解物？
A：細(xì)胞裂解液可在-20°C 下短期使用，但應(yīng)在-80°C 下長期保存。活化蛋白質(zhì)樣品的降解變化很大，這取決于蛋白質(zhì)的性質(zhì)和樣品中活化蛋白質(zhì)的含量。
問：我可以將該抗體在室溫下孵育 1 小時而不是在 4°C 下孵育過夜嗎？
答：我們的活化特異性抗體經(jīng)過純化，可僅區(qū)分一或兩個翻譯后修飾的氨基酸殘基。這些修飾包括磷酸化、乙酰化和酶切。與識別完整蛋白質(zhì)的抗體相比，針對此類修飾位點(diǎn)產(chǎn)生的大多數(shù)抗體具有較低的親和力。因此，通過在 4°C 下孵育過夜來延長抗體和抗原相互作用時間以獲得最佳信噪比至關(guān)重要。
問：如果一個物種沒有在數(shù)據(jù)表上列為與抗體交叉反應(yīng)，這是否意味著該物種沒有經(jīng)過測試？
答：如果我們在一個物種中沒有獲得陽性結(jié)果，我們不會列出該物種。我們測試的細(xì)胞系可能含有低水平的特定蛋白質(zhì)，或者我們使用的誘導(dǎo)在該特定細(xì)胞系中不起作用。因此，我們強(qiáng)烈建議您比較正在研究的物種和我們的抗體針對的物種之間修飾位點(diǎn)周圍的肽序列（每側(cè) 5 個氨基酸）。在大多數(shù)情況下，我們的抗體是針對人類蛋白質(zhì)序列產(chǎn)生的，并使用親和層析進(jìn)行高度純化。很多時候，如果序列相同或在修飾位點(diǎn)以外的殘基上只有 1 或 2 個氨基酸差異，則抗體很有可能識別您的蛋白質(zhì)。
問：為什么我不能對你們的抗體使用我自己實(shí)驗(yàn)室的蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)方案？
答：我們的抗體經(jīng)過優(yōu)化，可使用我們的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)方案以最少的背景提供*的信號。與您自己的程序相比，使用我們的協(xié)議，您將節(jié)省時間和材料。
問：為什么這種抗體不能通過蛋白質(zhì)印跡起作用？
答：我們的蛋白質(zhì)印跡程序有幾個細(xì)節(jié)對于避免信號丟失和/或高背景至關(guān)重要。不要過度清洗膜。應(yīng)使用 TBS/0.1% Tween-20 清洗 3 次，每次 10 分鐘。過度洗滌會洗掉一抗。推薦的洗滌條件經(jīng)過優(yōu)化以產(chǎn)生最佳的信噪比，從而獲得*、最干凈的結(jié)果。不要過度阻塞（例如，超過一小時或過夜）。過度封閉會降低某些抗體的特異性信號。請務(wù)必查閱各個產(chǎn)品的數(shù)據(jù)表，了解每種抗體的推薦封閉時間。您正在測試的物種是否列在抗體數(shù)據(jù)表的交叉反應(yīng)部分中？您是否加載了至少 20 µg 的總細(xì)胞裂解液？您是否誘導(dǎo)了細(xì)胞裂解物樣品中蛋白質(zhì)的活化？
問：我如何才能確保可重復(fù)的西方結(jié)果？
A : 關(guān)于為什么蛋白質(zhì)印跡結(jié)果似乎難以重復(fù)，有幾種可能性。要找出這種情況的原因，請考慮以下事項(xiàng)： 您是如何儲存抗體的？抗體在稀釋緩沖液中稀釋后不能重復(fù)使用。許多抗體的工作濃度非常低，每次連續(xù)印跡時濃度可能會降低。您確定您的樣品中含有活化蛋白嗎？用于活化蛋白質(zhì)的細(xì)胞裂解物樣品制備可能因細(xì)胞數(shù)量、藥物誘導(dǎo)時間、細(xì)胞傳代次數(shù)和儲存條件而異。我們的產(chǎn)品有望在保質(zhì)期內(nèi)以最佳水平運(yùn)行。
問：如何使用固定化抗體進(jìn)行 IP？
答：為了獲得最佳結(jié)果，獲得均勻的珠漿很重要。以下步驟將確保這種均勻性：將含有珠漿的管子放在冰桶中 10 分鐘。將管子倒轉(zhuǎn)幾次，以獲得 50% 的珠到緩沖液漿液。如有必要，輕輕渦旋管。為了準(zhǔn)確地吸取產(chǎn)品，切掉移液器吸頭的末端并將吸頭插入珠漿中，剛好足以吸取固定的抗體珠混合物。將固定化抗體與 200 µg 總細(xì)胞裂解物（約 1 mg/ml）以及推薦的抗體稀釋度在 4°C 下孵育過夜。
問：該抗體對 IHC 有效嗎？
答：我們會定期測試用于福爾馬林固定石蠟包埋樣品的抗體。IHC-P 推薦通過嚴(yán)格驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的那些。我們還在新鮮冷凍組織樣本上測試產(chǎn)品，推薦成功染色的產(chǎn)品用于 IHC-F。那些沒有將 IHC-P 或 IHC-F 列為推薦應(yīng)用的產(chǎn)品可能已經(jīng)失敗，可能沒有經(jīng)過測試，或者可能需要我們無法獲得的特定組織樣本。建議您 就您感興趣的產(chǎn)品缺乏 IHC 建議的性質(zhì)與我們聯(lián)系，因?yàn)榭赡苡袛?shù)據(jù)表明它可以在另一個系統(tǒng)中運(yùn)行良好。或者，我們可能有數(shù)據(jù)表明另一種產(chǎn)品將是組織染色的更好選擇。
問：這種抗體對 IF 有效嗎？
答：我們在大多數(shù)情況下通過免疫細(xì)胞化學(xué)測試了所有抗體，在某些情況下通過免疫熒光測試了所有抗體。最終結(jié)果顯示在數(shù)據(jù)表和網(wǎng)站上，或通過網(wǎng)站聯(lián)系我們以 獲取更多詳細(xì)信息。
問：你們?nèi)绾伪ＷC抗體的質(zhì)量？
答：Abwayss 努力在主要應(yīng)用中測試我們所有的產(chǎn)品，例如蛋白質(zhì)印跡、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)、FACS 和 IP。我們定期在不同的細(xì)胞或組織樣本（包括人類、小鼠和大鼠）上測試我們的抗體。我們產(chǎn)品的高質(zhì)量是 Abwayss 最重要的考慮因素。我們不斷針對新應(yīng)用測試我們的產(chǎn)品，如果您對數(shù)據(jù)表中未列出的特定應(yīng)用感興趣，請通過網(wǎng)站聯(lián)系我們的技術(shù)支持以獲取最新應(yīng)用更新或幫助解決您的任何問題。
問：您如何控制不同批次的質(zhì)量？
答：Abways努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的一致性或逐批改進(jìn)。作為標(biāo)準(zhǔn)，我們在我們推薦的所有應(yīng)用中測試新批次與舊批次。每個應(yīng)用的推薦稀釋度都按照我們的協(xié)議針對每個批次進(jìn)行了優(yōu)化。有時會調(diào)整大量抗體之間的濃度以獲得更好的結(jié)果。
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